HPLC整機幾項最關(guān)鍵的性能技術(shù)指標的測試方法

　　1、靈敏度的測試方法

　　HPLC的靈敏度可定義為：一、定量的物質(zhì)，通過(guò)HPLC的檢測器時(shí)，儀器所給出的信號大小就叫做該HPLC的靈敏度，有時(shí)也稱(chēng)為響應值。對使用者來(lái)講，總是希望HPLC儀器有較高的靈敏度，因為靈敏度高，就意味著(zhù)對等量的同一樣品進(jìn)行檢測時(shí)，儀器有較大的輸出信號。但是，靈敏度的高低，并不能表示HPLC儀器的檢測能力。只有檢出限，才能表示儀器的最大檢測能力。

　　HPLC靈敏度的測試方法：主要根據信噪比的定義進(jìn)行測試。一般取信號等于或大于噪聲2倍時(shí)的檢測量或濃度(信號強度)作為HPLC的信號大小。信號與噪聲二者相除即為儀器的信噪比(靈敏度，但是要求S/N≧2)。

　　2、檢測限測試方法

　　講HPLC的指標、給出HPLC的譜圖，應該實(shí)事求是的給出使用的靈敏度量程(一般使用最靈敏量程)，給出樣品濃度(一般是噪聲的3倍左右)，才能說(shuō)明儀器的檢測限或靈敏度。

　　3、光學(xué)類(lèi)檢測器噪聲的測試方法

　　HPLC的噪聲是一種與被測樣品無(wú)關(guān)的、隨機輸出的信號。國際上對噪聲的定義、測試方法各異。例如：美國材料協(xié)會(huì )制訂的測試標準(ASTM)，規定噪聲分為長(cháng)噪聲、短噪聲、和超短噪聲三種。長(cháng)噪聲是指每小時(shí)內有6個(gè)至60個(gè)變化周期的噪聲，所以，測定時(shí)間至少應該測試一小時(shí);短噪聲是指每小時(shí)內有1個(gè)至10個(gè)變化周期的噪聲，所以，測定時(shí)間至少應該測試10分鐘至60分鐘內;超短噪聲是指每分鐘內有10個(gè)以上的變化周期的噪聲，所以，測定時(shí)間應該大于1分鐘。

　　從使用者的角度看，噪聲又分為靜態(tài)噪聲和動(dòng)態(tài)噪聲。其測試方法如下：

　　1)靜態(tài)噪聲測試：冷態(tài)開(kāi)機(關(guān)機2小時(shí)后開(kāi)機)，預熱30分鐘，連續測試1小時(shí)。在這1小時(shí)里，任取10分鐘(包含最差的峰-峰值)，在這10分鐘里取峰對峰值(P-T0-P)的最大值，就是儀器的噪聲。但是，10分鐘里的峰對峰(P-T0-P)值，不同于10分鐘里的任一地方的峰-峰(P-P)值，即：“10分鐘里的峰對峰”值，不等于瞬時(shí)的峰-峰(P-P)值，測試數據前面應加“±”符號。

　　注意：開(kāi)機30分鐘后，儀器調整到最靈敏度檔(如：對量程為0.005-3.0AUFS的儀器，取0.005AUFS，即縱坐標設置為0.005A);設置波長(cháng)λ=250nm(有人設置500 nm，但最好測試250 nm);設置0 Abs(即時(shí)間掃描，吸光度從0點(diǎn)開(kāi)始測試);光譜帶寬(SBW)=2nm(固定光譜帶寬的儀器不需選擇)。

　　在上述條件下，連續測試1小時(shí)(用儀器上的CRT指示輸出，或用數字電壓表監測)。在1小時(shí)內，任取10分鐘的峰對峰值(P-T0-P)，其最大者前面加“±”符號，即是儀器的噪聲。目前，國際上大多數科技工作者，基本上采用這種方法測試HPLC儀器的靜態(tài)噪聲。

　　有些科技工作者，認為在10分鐘的峰對峰值(P-T0-P)前如果要加“±”符號，就應對峰-峰值的絕對值先除“2”。這種做法是不妥的，會(huì )低估儀器的噪聲。因為噪聲是隨機的，可能是“+”值也可以是“-”值。

　　上述儀器條件的設置，在有些儀器上是不需要的，因為由于計算機的發(fā)展和普遍應用，很多儀器的坐標設置，完全由儀器的計算機自動(dòng)設置。